一、主流系统及特性
酵母单杂交有三类常用系统，核心差异体现在载体、菌株及筛选标记：
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Y1HGold-pAbAi 系统
- 载体：pAbAi（含 AbAr 报告基因）需线性化后整合至酵母基因组；
- 菌株：Y1HGold；
- 筛选标记：抗生素 AbA（ Aureobasidin A）；
- 优势：稳定性高，适合大规模文库筛选。
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Y187-pHis2 系统
- 载体：pHis2（含 HIS3 报告基因）为环状质粒，无需线性化；
- 菌株：Y187；
- 筛选标记：3-AT（抑制 HIS3 本底表达）；
- 优势：操作简便，适合小规模互作验证。
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EGY48-pLacZi 系统
- 载体：pLacZi（含 LacZ 报告基因）需线性化整合；
- 菌株：EGY48（可与 YM4271 交配）；
- 筛选标记：X-gal 显色；
- 优势：直观显色反应，适合定性分析。
二、系统选择策略
- 文库筛选：优先 Y1HGold-pAbAi（库容大、稳定性强）；
- 快速验证：选 Y187-pHis2（无需线性化，流程短）；
- 定性分析：EGY48-pLacZi（显色结果易观察）。
三、关键操作差异
- 线性化：pAbAi、pLacZi 需用特定酶（如 BstBl）线性化，pHis2 可直接使用；
- 遗传稳定性：整合型载体（pAbAi、pLacZi）可在 YPDA 中扩繁，环状载体（pHis2）需用筛选培养基防止丢失。
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