载体设计 - 载体设计技术,学习,经验文章

蛋白界小百灵

2 小时前

shRNA慢病毒载体设计实践：启动子、发夹结构与敲低效率的工程化权衡RNA干扰（RNAi）介导的基因沉默在功能基因组学研究中应用多年，而shRNA慢病毒载体的价值在于把这一机制变成"可遗传"的：短发夹RNA的表达盒随载体整合进宿主基因组，细胞分裂后沉默效应持续存在，这是化学合成siRNA转染难以企及的场景，尤其适合原代细胞、干细胞以及需要长期观察的体内实验。2002年Brummelkamp等人将发夹结构表达框导入哺乳动物细胞并实现稳定的靶基因沉默，奠定了这一技术路线的基础。