PEI是一种优化的线性阳离子聚合物,分子量分别为25000和40000。PEI 40000相比于25000转染效率高,但毒性也略大于PEI 25000。在 HEK 293和CHO的蛋白表达系统中,Polysciences PEI转染试剂蛋白表达量高(无论是96孔板还是100L的细胞反应器)、细胞毒性小、转染效率高、可重复性高,深受广大科研人员的欢迎。在进行细胞转染实验前,实验人员通常都会阅读转染试剂说明书,将其放置在适宜的存储环境下。本文将对PEI转染试剂说明书进行探讨,了解PEI转染试剂的属性、操作流程以及注意事项。
PEI 转染试剂说明书之产品属性:
化学名:线性聚乙烯亚胺,线性 PEI,聚乙烯亚胺,线性,MW 25000,转染级;
规格:1g;
分子式:(CH2CH2NH)n;
分子量:25,000;
熔点:73-75℃;
溶于:热水,低 pH 冷水,甲醇和乙醇;
不溶于:苯,乙醚和丙酮;
外观:白色至黄色固体;
储存:4 度避光干燥保存,配置好的工作液 4 度避光保存;
递送的分子:脱氧核糖核酸;
应用:质粒转染,高通量筛选(HTS);
细胞类型:贴壁细胞和悬浮细胞。
PEI 转染试剂说明书之工作液配置 (1 mg/mL):
1、1g PEI 25,000 溶解于900ml去离子水中,加热(60-80 ℃)并搅拌加入HCL(12 M)调整PH值至2-3,继续搅拌直至粉末完全溶解(至少3小时以上,最好过夜)。
2、用 NaOH(10M)调整pH至6.9-7.1。
3、将溶液转入量筒(或量杯)定容至1L。
4、用(0.2um)滤器真空过滤消毒,分装保存在4°C至少稳定保存3个月。
PEI 转染试剂说明书之注意事项:
1、加热或加酸都有助于PEI溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到pH那么低。
2、一定要溶解充分,溶解不充分会影响后续的转染效率。
PEI 转染试剂说明书 之产品特点:
1、转染效率高,细胞毒性低;
2、蛋白表达量高;
3、节约成本:PEI至少能够降40%的转染试剂总成本;
4、适用于HEK293等真核细胞的转染;
5、适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;
6、适用于有血清和无血清的转染条件;
7、无机试剂,无动物源成分;
8、产品稳定,质控严格;
9、工艺流程适用范围广,容易优化,适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。