PEI转染试剂说明书,你读懂了么?

PEI是一种优化的线性阳离子聚合物,分子量分别为25000和40000。PEI 40000相比于25000转染效率高,但毒性也略大于PEI 25000。在 HEK 293和CHO的蛋白表达系统中,Polysciences PEI转染试剂蛋白表达量高(无论是96孔板还是100L的细胞反应器)、细胞毒性小、转染效率高、可重复性高,深受广大科研人员的欢迎。在进行细胞转染实验前,实验人员通常都会阅读转染试剂说明书,将其放置在适宜的存储环境下。本文将对PEI转染试剂说明书进行探讨,了解PEI转染试剂的属性、操作流程以及注意事项。

PEI 转染试剂说明书之产品属性:

化学名:线性聚乙烯亚胺,线性 PEI,聚乙烯亚胺,线性,MW 25000,转染级;

货号:23966-1

规格:1g;

分子式:(CH2CH2NH)n;

分子量:25,000;

熔点:73-75℃;

溶于:热水,低 pH 冷水,甲醇和乙醇;

不溶于:苯,乙醚和丙酮;

外观:白色至黄色固体;

储存:4 度避光干燥保存,配置好的工作液 4 度避光保存;

递送的分子:脱氧核糖核酸;

应用:质粒转染,高通量筛选(HTS);

细胞类型:贴壁细胞和悬浮细胞。

PEI 转染试剂说明书之工作液配置 (1 mg/mL):

1、1g PEI 25,000 溶解于900ml去离子水中,加热(60-80 ℃)并搅拌加入HCL(12 M)调整PH值至2-3,继续搅拌直至粉末完全溶解(至少3小时以上,最好过夜)。

2、用 NaOH(10M)调整pH至6.9-7.1。

3、将溶液转入量筒(或量杯)定容至1L。

4、用(0.2um)滤器真空过滤消毒,分装保存在4°C至少稳定保存3个月。

PEI 转染试剂说明书之注意事项:

1、加热或加酸都有助于PEI溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到pH那么低。

2、一定要溶解充分,溶解不充分会影响后续的转染效率。

PEI 转染试剂说明书 之产品特点:

1、转染效率高,细胞毒性低;

2、蛋白表达量高;

3、节约成本:PEI至少能够降40%的转染试剂总成本;

4、适用于HEK293等真核细胞的转染;

5、适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;

6、适用于有血清和无血清的转染条件;

7、无机试剂,无动物源成分;

8、产品稳定,质控严格;

9、工艺流程适用范围广,容易优化,适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。

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