一、基础介绍
生物素-二氢咖啡酸（Biotin-DHCA）亲和探针依托生物素 - 链霉亲和素富集体系，结合 Pull-down+LC-MS 化学蛋白质组学，直接捕获二氢咖啡酸互作蛋白，是多酚代谢、肠道微生物 - 宿主互作、炎症疾病研究核心化学工具。
探针模块化结构：二氢咖啡酸母核 + Linker（烷基 / PEG4）+ 生物素。
二、合成路线
核心构效关键点 邻苯二酚（3,4 - 二酚羟基）是 DHCA 与靶蛋白氢键结合、抗氧化、共价结合半胱氨酸残基的核心药效基团； 苯环上两个酚羟基严禁修饰封闭！仅可修饰末端丙酸羧基。
酚羟基保护 - 羧基选择性偶联路线【Pull-down 首选成熟方案】
合成路线：
1.温和条件下使用乙酰基 / 硅基正交保护苯环 3,4 位酚羟基，避免酚羟基参与反应；
2.末端丙酸游离羧基经 EDC/NHS 活化；
3.与两端氨基 Linker 缩合，生成酰胺中间体；
4.Linker 远端伯氨基与 Biotin-LC-NHS / Biotin-PEG4-NHS 避光酰胺偶联；
5.温和脱保护，完整释放邻苯二酚羟基；
6.制备型 C18 反相 HPLC 纯化，去除游离生物素、副产物，冻干得到纯品探针。
优势：完整保留邻苯二酚核心药效结构；酰胺键生理缓冲液稳定，不易水解。 Linker 推荐：炎症、肠道细胞靶点筛选优先选用PEG4 柔性接头，降低疏水作用、减少非特异性吸附。
三、应用方向：
抗炎与软骨保护机制研究
抗氧化与皮肤光保护机制探索
靶标蛋白垂钓（Pull-down）与鉴定
体外检测与含量测定
生物素-全氟辛酸
生物素-γ-氨基丁酸,Biotin-GABA
Biotin-Gambogenic acid
生物素-甘油磷酸钠盐
Biotin-Putrescine
生物素-昆布多糖
Biotin-ALCAR
Biotin-Hydrazide
Biotin-Abacavir
Biotin-CD环糊精
生物素-人参皂苷Rg1
Biotin-vitamin B1
生物素-苯乙酰谷氨酰胺
Biotin-Amphotericin B
生物素-异牡荆素
生物素-薯蓣皂苷
生物素-烟酰胺
生物素-谷胱甘肽
生物素-3,4-二羟基苯丙酸
生物素-α-苯乙胺
生物素-水解蚕丝蛋白
生物素-脱落酸
生物素-左旋肉碱
Biotin-Polymyxin B
生物素-维替泊芬