卡梅德生物技术快报|兔单克隆抗体应用实战:禽源病原 IFA 检测全流程拆解首先对核心技术难点进行深度拆解。第一,抗原表达与纯化难点:本次研究选用大肠杆菌原核表达系统表达 F 蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在,包涵体蛋白变性后易丢失天然构象,直接影响后续动物免疫与抗体筛选效果,这是原核表达大分子功能蛋白的共性问题。第二,杂交瘤细胞筛选难点:细胞融合环节对细胞活性、PEG 浓度、融合时间要求极高,融合后大量杂细胞会干扰筛选工作;ELISA 初筛仅能判断结合活性,无法验证抗体在细胞水平的反应能力,容易筛选出假阳性克隆。兔单克隆抗体的制备同样基于杂交瘤技术,兔脾细胞与融合伴侣的融合效率