R-PE Streptavidin;藻红蛋白标记的链霉亲和素的产品科普

R-PE-Streptavidin(SA-R-PE,R-PE 链霉亲和素),是链霉亲和素与 R - 藻红蛋白共价交联的蛋白偶联物,属于藻胆蛋白类荧光探针,依托生物素-链霉亲和素高亲和作用,实现高灵敏度橙红色荧光检测,用于流式、免疫检测、生物芯片等科研场景。

基础产品信息

· 英文名称:R-PE Streptavidin / SA-R-PE

· 中文名称:R-藻红蛋白标记链霉亲和素

· 光谱(PBS pH7.4):主吸收 565 nm,次吸收 496 nm;发射 576-578 nm;488 nm 蓝激光可激发

· 组分分子量:链霉亲和素~66 kDa;R-PE 藻红蛋白~240-290 kDa;完整偶联物约 300-360 kDa

· 性状:红色透明液体;少数为冻干红色粉末

· 结合特性:四聚体链霉亲和素,1 分子可结合 4 分子生物素,Kd≈10⁻¹⁴ mol/L;非糖基化,非特异吸附远低于卵清亲和素

· 供货缓冲体系:pH7.2-7.4 PBS,常添加 BSA 做蛋白保护剂,含 0.02-0.05% 叠氮化钠抑菌(活细胞功能实验禁用)

· 适用范围:仅限科研实验,不可人体临床给药

分子与性能特点

核心优势

  1. 荧光亮度极高:摩尔消光系数大、量子产率高,整体亮度是 FITC 有机染料 5-10 倍,适合低丰度靶标检测,信噪比良好。

  2. 水溶性良好,水相中不易聚集;偶联后同时保留链霉亲和素生物素结合活性与 R-PE 完整荧光性能。

  3. 光谱适配流式:488 nm 通用蓝激光即可激发,橙红色通道,适合多色组合染色。

  4. 背景低:链霉亲和素不带糖基,电荷接近中性,非特异性吸附弱。

固有短板

  1. 光稳定性偏弱 ,强光照射快速光漂白,不适合长时间共聚焦显微镜成像,更适配流式、芯片、微孔板检测。

  2. 对冻融非常敏感 ,冷冻-解冻会造成 R-PE 蛋白亚基解离,发色团丢失,荧光不可逆下降;液态成品严禁 - 20℃冷冻

  3. 不耐高温,>45℃易发生蛋白变性、荧光淬灭。

  4. pH 耐受窗口较窄,稳定区间 pH 5-8,过酸过碱会造成藻胆蛋白解聚失活。

推荐工作浓度

· 流式细胞:0.5-5 μg/mL,建议做滴定优化;

· 免疫细胞 / 冰冻切片:1-10 μg/mL;

· 芯片、微孔板:0.2-2 μg/mL。

全部操作需要避光孵育。

储存与常见故障解析

  1. 标准储存

· 液态成品:2 - 8 ℃避光,禁止冷冻,不可-20℃冻存;有效期 6-12 个月。

· 冻干粉末:-20 ℃干燥避光密封;回温后再开盖防潮,复溶后按液态条件保存。

· 含叠氮化钠的试剂,不可用于活细胞功能实验。

  1. 常见问题

· 荧光大幅下降:①发生冷冻冻融,R-PE 亚基解离;②光照时间过长发生光氧化;③温度过高;该损伤不可修复。

· 溶液浑浊、沉淀:高温、pH 偏离中性、微生物污染,蛋白变性,直接报废。

· 染色信号弱、背景高:试剂失效;浓度不合适;样本中存在游离生物素竞争结合位点。

提示:不要添加 DTT、TCEP 还原剂,还原剂会破坏藻胆蛋白发色团,直接淬灭荧光。

------以上资料由XARuiXi小编提供,仅用于科研!

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