肝脏作为人体代谢与解毒的核心器官，其功能损伤的渐进性发展往往导致不可逆的病理改变，肝硬化便是终末期肝病的典型表征。我国作为肝病高发国家，肝硬化病因复杂多样，涵盖病毒性肝炎、代谢相关脂肪性肝病（MASLD）、酒精性肝病等多种类型，且疾病进展过程中常伴随肝纤维化加重、门脉高压及肝性肾综合征（HRS）等严重并发症，其中HRS发生率高达18%-39%，1年病死率超80%。传统诊断手段依赖影像学评估与肝穿刺活检，前者对早期病变敏感性不足，后者作为有创检查难以满足动态监测需求。因此，发掘特异性强、检测便捷的生物标志物，结合高效检测技术实现肝硬化的早期诊断、进展监测及预后评估，成为当前临床研究与转化的核心方向。
一、肝硬化相关生物标志物研究现状
肝硬化的病理进程涉及肝细胞坏死与再生、肝星状细胞活化、细胞外基质沉积、全身炎症反应及血管动力学紊乱等多重机制，对应的生物标志物可按病理环节分为五大类，各类标志物在疾病诊疗中发挥独特价值。
1. 纤维化与门脉高压标志物
此类标志物直接反映肝纤维化程度与门脉高压状态，是评估肝硬化基础病理背景的核心指标。透明质酸（HA）作为细胞外基质的关键成分，由肝窦内皮细胞摄取降解，肝硬化时内皮细胞功能受损导致其血清水平显著升高，已成为临床常用的纤维化评估指标。层黏蛋白（LN）与Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNP）则分别反映基底膜重构与胶原合成速率，与肝纤维化分期高度相关。此外，金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）由肝星状细胞分泌，通过抑制基质金属蛋白酶活性促进胶原沉积，其水平不仅能评估纤维化程度，还与肝细胞再生及库普弗细胞活化状态相关。
2. 肾损伤与全身并发症标志物
肝硬化合并肾功能损伤是临床诊疗的难点，传统肌酐指标因受肌肉量、利尿剂使用等因素影响，难以准确反映肾小球滤过率。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）在肾小管缺血或炎症刺激下2-6小时即可升高，诊断HRS-AKI的曲线下面积（AUC）达0.89，显著优于肌酐（0.72）。肾损伤分子-1（KIM-1）与胱抑素C（Cystatin C）则分别从肾小管损伤特异性与肾小球滤过功能评估角度提供补充，其中联合检测Cystatin C与肌酐可将HRS诊断AUC提升至0.86。
3. 炎症与免疫标志物
肠道屏障功能受损引发的细菌易位及全身炎症反应，是肝硬化进展的重要驱动因素。白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作为核心炎症因子，可通过损伤血管内皮细胞加重血管扩张与微循环障碍，其水平不仅能鉴别感染相关急性肾损伤与HRS，还可预测炎症介导的肾损伤风险。降钙素原（PCT）与可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）则能更精准地反映细菌感染状态，为肝硬化合并感染的早期干预提供依据。
4. 肝功能与再生标志物
此类标志物通过评估肝储备功能间接反映肝硬化进展风险。肝细胞生长因子（HGF）作为促进肝细胞再生的关键因子，其血清水平与肝功能Child-Pugh分级呈正相关，HGF>1500pg/mL时HRS发生风险增加2.8倍。可溶性CD163作为库普弗细胞活化标志物，可有效反映肝细胞坏死程度，而几丁质酶-3样蛋白-1（YKL-40）已获批NMPA注册产品，用于肝纤维化/硬化的辅助诊断。
5. 新型代谢相关标志物
近年研究发现，脂蛋白（a）（Lp(a)）作为肝脏合成的特殊脂蛋白，其水平与肝硬化风险呈现独特的"L"型关联：极低（<10.75nmol/L）或极高（>21.5nmol/L）水平均会使肝硬化风险显著升高，且遗传预测的Lp(a)浓度与疾病进展高度相关，为代谢相关肝硬化的风险评估提供了新维度。
肝硬化相关生物标志物分类表
| 分类 | 指标名称 | 英文缩写 | 核心功能 |
|---|---|---|---|
| 纤维化与门脉高压标志物 | 透明质酸 | HA | 细胞外基质关键成分，由肝窦内皮细胞摄取降解 |
| 纤维化与门脉高压标志物 | 层黏蛋白 | LN | 反映基底膜重构状态 |
| 纤维化与门脉高压标志物 | Ⅲ型前胶原氨基端肽 | PⅢNP | 反映胶原合成速率 |
| 纤维化与门脉高压标志物 | 金属蛋白酶组织抑制因子-1 | TIMP-1 | 肝星状细胞分泌，抑制基质金属蛋白酶活性促进胶原沉积 |
| 肾损伤与全身并发症标志物 | 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 | NGAL | 肾小管缺血或炎症刺激下快速升高 |
| 肾损伤与全身并发症标志物 | 肾损伤分子-1 | KIM-1 | 特异性反映肾小管损伤 |
| 肾损伤与全身并发症标志物 | 胱抑素C | Cystatin C | 评估肾小球滤过功能 |
| 炎症与免疫标志物 | 白细胞介素-6 | IL-6 | 核心炎症因子，损伤血管内皮细胞 |
| 炎症与免疫标志物 | 肿瘤坏死因子-α | TNF-α | 核心炎症因子，加重血管扩张与微循环障碍 |
| 炎症与免疫标志物 | 降钙素原 | PCT | 反映细菌感染状态 |
| 炎症与免疫标志物 | 可溶性髓系细胞触发受体-1 | sTREM-1 | 精准反映细菌感染状态 |
| 肝功能与再生标志物 | 肝细胞生长因子 | HGF | 促进肝细胞再生 |
| 肝功能与再生标志物 | 可溶性CD163 | sCD163 | 库普弗细胞活化标志物 |
| 肝功能与再生标志物 | 几丁质酶-3样蛋白-1 | YKL-40 | 参与炎症与组织重构 |
| 新型代谢相关标志物 | 脂蛋白（a） | Lp(a) | 肝脏合成的特殊脂蛋白，参与脂质代谢 |
二、肝硬化生物标志物核心检测技术：Luminex液相芯片与MSD超敏电化学发光
肝硬化的精准评估往往需要同时检测多维度生物标志物，传统ELISA技术虽特异性良好，但单次检测仅能分析单一指标，且样本消耗量较大。Luminex与MSD技术凭借高通量、高灵敏度的优势，成为多因子检测的主流技术方案，为肝硬化生物标志物的联合检测提供了高效工具。
1. Luminex xMAP®技术：高通量多因子检测的标杆
Luminex技术以xMAP®为核心，通过红色与近红外荧光染料的不同配比对5.6μM磁性微球进行编码，每种编码微球包被特异性抗体或探针，可同时捕获多种靶标。检测时形成"捕获抗体-靶标-荧光标记检测抗体"的夹心结构，仪器通过红激光识别微球编码确定靶标种类，绿激光检测荧光强度实现定量分析。
该技术在肝硬化检测中的优势显著：
一是高通量特性，单次实验可检测同份样本中数十至数百种标志物，尤其适用于IL-6、TNF-α与HA、PⅢNP等炎症及纤维化指标的联合检测；
二是高灵敏度与宽检测范围，灵敏度优于传统ELISA，检测范围达3-4个数量级，可同时覆盖低丰度细胞因子与高丰度基质蛋白；
三是样本经济性，仅需25μL样本即可完成多指标检测，极大适配临床微量样本（如穿刺样本）的检测需求。
目前基于该技术开发的生物标志物检测种类超450种，已广泛应用于肝硬化多因子筛查与机制研究。
2. MSD超敏电化学发光技术：高灵敏低背景的精准检测方案
MSD（Meso Scale Discovery）技术基于电化学发光（ECL）原理，以碳电极作为固相载体，通过特异性抗体捕获靶标后，利用电化学激发发光标记物产生信号，信号强度与靶标浓度呈正相关。该技术支持直接法、间接法等多种检测模式，在蛋白类生物标志物检测中展现出独特优势。
针对肝硬化生物标志物检测，MSD技术的核心价值体现在三个方面：
其一，极低的背景信号使检测灵敏度大幅提升，可精准量化血清中低丰度的HGF、TIMP-1等肝功能相关标志物；
其二，宽动态范围与高重复性确保检测结果的稳定性，适用于不同病程阶段样本的连续监测；
其三，灵活的检测模式支持从单一指标验证到多因子组合检测的多样化需求，可匹配肝硬化并发症（如HRS）的特异性标志物组合检测场景。
凭借这些优势，MSD技术已在肝硬化生物标志物验证及临床转化研究中获得广泛应用。
