高QE sCMOS相机在SIM超分辨显微成像中的应用

1实验背景

细胞是生命科学领域基本功能单元,解析亚细胞器及细胞骨架等精细结构是研究重点。传统光学显微镜受制于衍射极限,难以清晰呈现100nm尺度的细胞精细结构,结构光照明显微是一种宽场超分辨成像技术,通过空间调制照明与频域重建算法,可将横向分辨率提升至~100nm,成为细胞超分辨率成像新路径。

SIM需在极低光毒性条件下实现活细胞高速动态成像,故对成像系统灵敏度、噪声控制、时间分辨率要求极高,某课题组采用中科君达视界自研的千眼狼sCMOS相机Gloria 4.2,量子效率高达95%,开展对生物细胞骨架的超分辨动态成像实验。

2实验目标

I. 评估sCMOS相机在SIM超分辨显微镜中对百纳米尺度细胞样本的成像能力。

II.评估sCMOS相机在低曝光(低光毒性要求)时间下的信噪比表现。

3实验方法

实验使用倒置荧光显微镜,集成SIM超分辨成像模块。样本为荧光标记的细胞骨架,经标准制备后固定于载物台上。图像探测采用千眼狼Gloria 4.2 sCMOS相机,设置ROI分辨率为960×368,Binning模式2×2(提升灵敏度),曝光时间10 ms,帧率100 fps,使用外触发同步,读出模式选用CMS低噪声模式,以优化图像信噪比。

4实验数据解析

4.1成像性能解析:

10 ms曝光条件下,千眼狼Gloria 4.2相机可实现100 fps帧率采集,优于同条件下EMCCD相机,后者仅支持10 ms内30 fps采集帧率,图像数据获取效率较低。

4.2 图像质量解析:

  • 单帧图像:10 ms曝光下,sCMOS相机捕捉的图像计算重构后可呈现细胞骨架的轮廓微丝网络结构(图1),纤维走向、分支结构等特征初步可辨识,清晰可见微管纤维的局部交叉点且无拖影现象,证明低光强下拥有95%高QE、100 fps采集帧率的sCMOS相机可有效捕获微弱荧光信号。

图1

  • 合成图像:经SIM算法重建后,合成图像分辨率达到约100 nm,突破衍射极限,使得微管纤维的分支点、交叉形态清晰可辨,且凭借Gloria 4.2相机高动态范围(16 bit),合成图像在弱信号区域(如细胞基质)与强信号区域(荧光团聚集处)均表现出良好的线性响应与细节保留能力,未出现饱和现象。

图2

本次实验成功将高量子效率 95%的sCMOS相机 Gloria 4.2集成于SIM超分辨显微系统,实现了在100 fps下对细胞样本的百纳米级分辨率成像。实验结果表明,中科君达视界自研的千眼狼sCMOS相机适用于低光毒性、低噪声、高速的生命科学领域图像探测任务。

相关推荐
LitchiCheng13 小时前
还在改xml调相机?MuJoCo交互式可视化调整相机安装位置
xml·数码相机
PHOSKEY1 天前
光子精密QM系列闪测仪在数控机床上切槽刀精密尺寸测量的应用案例
数码相机
在世修行1 天前
深度图像数据格式与RAW文件解析:从字节到三维世界的桥梁
人工智能·数码相机·计算机视觉
PHOSKEY2 天前
光子精密闪测仪在具身机器人灵巧手齿轮尺寸检测质量管控中的应用
数码相机
浪里镖客2 天前
zed 2i相机坐标系与内参、外参
数码相机·opencv·计算机视觉
爱分享的康康3 天前
解锁路测数据价值|康谋自动驾驶采集‑分析全链路方案解读
人工智能·数码相机·自动驾驶
光电的一只菜鸡3 天前
semi planar和planar的区别
数码相机
格林威3 天前
多相机并行采图最佳实践:Task.WhenAll + 异常处理 + 资源释放
开发语言·人工智能·数码相机·计算机视觉·c#·视觉检测·机器视觉
微小冷3 天前
海康威视相机C#二次开发环境配置
数码相机·c#·.net·海康威视·相机开发